CRM-ATX 魚腥藻毒素a校準溶液Anatoxin-a(ATX-a)是一種藍藻毒素，與北美[1]和全球[2]的動物死亡有關。CRM-ATX是一種經(jīng)認證的校準液，用于協(xié)助分析人員測定ATX-，每個安瓿中含有大約0.5毫升的ATX-a，以0.01%的乙酸溶解在甲醇水中(9：91，Viv)。

CRM-ATX是一種校準溶液標準物質(CRM)，用于ATX-A的分析方法開發(fā)和精確定量。CRM濃度使其適合于制備用于儀器校準的稀釋系列，如用紫外吸收法(LC-UV)、熒光法(LC-FL)或質譜法(LC-MS)檢測的液相色譜，以及用于回收實驗的控制樣品。

ATX的準備

ATX-a是從一種異青藤的藻類培養(yǎng)物中分離得到的。從細胞中提取毒素，經(jīng)層析純化后，真空干燥至無水形態(tài)[4.5]。將純化的ATX-a溶于9：91的脫氣甲醇中，用0.01%的乙酸溶解制得CRM溶液。溶液與聚四氟乙烯包覆攪拌棒和磁混合器完全混合，在氬氣下攪拌.在琥珀玻璃安瓿中預先加入氬，然后立即進行火焰密封，每個安瓿中含有約0.5毫升的溶液。

同質性：由于CRM-ATX 魚腥藻毒素a校準溶液是一個真正的解決方案，所以安瓿之間的變化應該很小。然而，大約0.8%的安瓿是隨機選擇的，ATX-a濃度是用LC-UV測量的。安瓿之間的變化不大于對一種溶液進行復制分析時的變化，因此在整個安瓿范圍內(nèi)表現(xiàn)出可接受的同質性。

穩(wěn)定性研究：已進行了廣泛的研究，以確定CRM-ATX 魚腥藻毒素a校準溶液在各種條件下的穩(wěn)定性。ATX-a在堿性溶液中不穩(wěn)定，對光敏感[10]。對以前的ATX-a制劑的可行性研究表明，貯存在+4°C的水溶液-儲存酸化甲醇/水的溶液具有良好的長期穩(wěn)定性。在幾種溫度(-80°C，-20°C，+4°℃，+25 C和+37°C)下，對CRM-ATX進行了長期穩(wěn)定性研究。ATX--在-20°C儲存，在+4°C下分解小于3%，10天后在+37°C保存時，其降解率小于2%。

結構確認和純度評估

采用500 MHz核磁共振譜、LC-MS[6J，LC-UV]、毛細管電泳-紫外檢測(CE-UV)[7]和液相色譜-化學發(fā)光氮檢測(LC-CLND)[8]等技術對該毒素的純度進行了檢測。用核磁共振[9]和四極飛行時間(QToF)質譜確證了ATX-a的分子結構.[M+H]~*離子在166.12269Da，在理論單同位素質量166.12264 Da(=0.30ppm)的0.05MDA范圍內(nèi)，獲得了[M+H]~*離子的串聯(lián)質譜譜，如圖2.NMR、LC-MS、LC-UV和LC-CLND所示，未觀察到主要雜質。